Epidemiologic and antibiotic resistance profile and detection of meca gene in Staphylococcus spp. isolates from dog-owning veterinary students / Perfil epidemiológico e de resistência a antibióticos e detecção do gene meca em Staphylococcus spp. isolados de estudantes veterinários proprietários de cães / Perfil de resistencia epidemiológica y antibiótica y detección de género meca en Staphylococcus spp. estudiantes veterinarios aislados de perros

The maintenance of pets as reservoirs of multiresistant bacteria and the transmission of microorganisms such as Staphylococcus spp. between animals and humans can affect the effectiveness of antimicrobials in human medicine. The aim of this study was to detect risk factors, evaluate the phenotypic profile of antimicrobial resistance and detect the mecA gene in Staphylococcus spp. isolated from the nasal cavity of students of veterinary medicine who own dogs. This is a field survey where 35 nasal swab samples were collected to isolate Staphylococcus spp. The antimicrobial resistance of the isolates and the classification according to the multidrug resistance profile (MDR) were determined. The presence of the mecA gene was investigated in isolates with resistance to oxacillin. In addition, the research subjects answered a questionnaire about behavior towards the dog and hygiene habits to identify risk variables for developing antimicrobial resistance. The antimicrobials tested were ampicillin, penicillin, oxacillin, cephalothin, clindamycin, gentamicin, erythromycin, enrofloxacin, and tetracycline. 92.9% of coagulase-positive staphylococci (CoPS) and 45% of coagulase-negative staphylococci (CoNS) were resistant to the beta-lactam class, and 28.6% of CoPS and 45% of CoNS showed MDR profile. Three isolates were classified as resistant to oxacillin, and the mecA gene was detected in 100% of these isolates. About half of the individuals used antimicrobials in the last 12 months (52.9%), and 75% used amoxicillin, which could explain the high antimicrobial resistance profile. Dog owners harbor Staphylococcus spp. with high resistance to beta-lactam antimicrobials and a multi-resistance profile, representing a unique One Health problem.

A manutenção de pets como reservatórios de bactérias multirresistentes e a transmissão de microrganismos como Staphylococcus spp. entre animais e humanos podem afetar a eficácia de antimicrobianos na medicina humana. O objetivo deste estudo foi detectar fatores de risco, avaliar o perfil fenotípico de resistência antimicrobiana e detectar o gene mecA em Staphylococcus spp. isolados da cavidade nasal de estudantes de medicina veterinária proprietários de cães. Trata-se de pesquisa de campo onde 35 amostras de swab nasal foram coletadas para isolar Staphylococcus spp. A resistência antimicrobiana e a classificação segundo o perfil de multirresistência (MDR) dos isolados foram determinadas. A presença do gene mecA foi investigada em isolados resistentes à oxacilina. Os estudantes responderam a um questionário sobre comportamento em relação ao cão e hábitos de higiene para identificar variáveis de risco para o desenvolvimento de resistência antimicrobiana. Foram testados os antimicrobianos ampicilina, penicilina, oxacilina, cefalotina, clindamicina, gentamicina, eritromicina, enrofloxacina e tetraciclina. 92,9% dos estafilococos coagulase-positivos (CoPS) e 45% dos estafilococos coagulase-negativos (CoNS) foram resistentes à classe dos beta- lactâmicos e 28,6% CoPS e 45% CoNS apresentaram perfil MDR. Três isolados foram classificados como resistentes à oxacilina e o gene mecA foi detectado em 100% destes isolados. Mais da metade dos indivíduos fez uso de antimicrobiano nos últimos 12 meses (52,9%), 75% fizeram uso de amoxicilina, o que poderia explicar o alto perfil de resistência antimicrobiana. Os donos de cães abrigam Staphylococcus spp. com alta resistência aos antimicrobianos beta-lactâmicos e apresentam MDR, o que representa um problema de saúde única.

El mantenimiento de las mascotas como reservorios de bacterias multiresistentes y la transmisión de microorganismos como Staphylococcus spp. entre animales y seres humanos pueden afectar a la eficacia de los antimicrobianos en la medicina humana. El objetivo de este estudio fue detectar factores de riesgo, evaluar el perfil fenotípico de la resistencia antimicrobiana y detectar el gen meccaA en Staphylococcus spp. aislado de la cavidad nasal de estudiantes veterinarios dueños de perros. Se trata de una investigación de campo en la que se recogieron 35 muestras de hisopo nasal para aislar Staphylococcus spp. Se determinó la resistencia antimicrobiana y la clasificación de los aislados por perfil de multiresistencia (MDR). La presencia del gen de la mecaA se ha investigado en aislados resistentes a oxacilina. Los estudiantes respondieron a un cuestionario sobre comportamiento de perros y hábitos de higiene para identificar variables de riesgo para el desarrollo de resistencia antimicrobiana. Se han estudiado antimicrobianos como ampicilina, penicilina, oxacilina, cefalotina, clindamicina, gentamicina, eritromicina, enrofloxacina y tetraciclina. El 92,9% de los estafilococos coagulasa-positivos (CoPS) y el 45% de los estafilococos coagulasa- negativos (CoNS) fueron resistentes a la clase beta-lactam y el 28,6% de los CoPS y el 45% de los CoNS tenían un perfil de MDR. Se clasificaron tres aislados como resistentes a la oxacilina y se detectó el gen de la mecaA en el 100% de estos aislamientos. Más de la mitad de los individuos utilizaron antimicrobianos en los últimos 12 meses (52,9%), el 75% utilizó amoxicilina, lo que podría explicar el alto perfil de resistencia antimicrobiana. Los dueños de perros albergan Staphylococcus spp. con alta resistencia a los antimicrobianos beta-lactámicos y tienen MDR, lo que representa un único problema de salud.

Resistência antimicrobiana na infecção urinária em unidade de terapia intensiva / Antimicrobial resistance in urinary tract infection in the intensive care unit / Resistencia a los antimicrobianos en la infección del tracto urinario en la unidad de cuidados intensivos

A infecção do trato urinário (ITU) nada mais é do que o acometimento das vias urinárias por microrganismo. Entre as infecções hospitalares de maior incidência está a infecção do trato urinário, acometendo mais mulheres do que homens. Uma das possíveis causas dessa infecção, em pacientes na unidade de terapia intensiva (UTI), é o uso de cateter vesical. Seu tratamento inadequado pode ocasionar uma pielonefrite, podendo adentrar à circulação sanguínea, gerando uma infecção sistêmica e levar o paciente a óbito. A resistência antimicrobiana é uma das principais dificuldades encontrada em UTI sendo considerado um problema de saúde pública. O objetivo deste trabalho foi realizar um breve relato, baseado na literatura, sobre a resistência antimicrobiana na infecção urinária em unidade de terapia intensiva adulta. Em ambientes hospitalares o principal microrganismo causador de ITU é Escherichia coli, sendo 55,5% das culturas positivas estão associadas a procedimentos invasivos, como as sondas vesicais de demora, como consequência este é o microrganismo que mais apresenta resistência aos antimicrobianos utilizados como a ampicilina, trimetoprima e ciprofloxacino. O uso indiscriminado de antibióticos deixa em evidência a necessidade de análise criteriosa da real necessidade de qual antimicrobianos usar, tempo de uso e forma correta de administração. Portanto é necessária a ação dos profissionais de saúde frente a atenção ao paciente, desde a higiene das mãos, uso do cateter, quando necessário observar a real necessidade do uso do antimicrobianos e que esse seja feito após cultura e antibiograma.

Urinary tract infection (UTI) is nothing more than the involvement of the urinary tract by a microorganism. Among the hospital infections with the highest incidence is urinary tract infections, affecting more women than men. One of the possible causes of this infection in patients in the intensive care unit (ICU) is the use of a bladder catheter. Its inadequate treatment can cause pyelonephritis, which can enter the bloodstream, generating a systemic infection and leading the patient to death. Antimicrobial resistance is one of the main difficulties encountered in ICUs and is considered a public health problem. The objective of this study was to present a brief report, based on the literature, on antimicrobial resistance in urinary tract infections in an adult intensive care unit. In hospital environments, the main microorganism that causes UTI is Escherichia coli, and 55.5% of positive cultures are associated with invasive procedures, such as indwelling urinary catheters, as a consequence, this is the microorganism that is most resistant to antimicrobials used, such as ampicillin, trimethoprim and ciprofloxacin. The indiscriminate use of antibiotics highlights the need for a careful analysis of the real need for which antimicrobials to use, time of use, and correct form of administration. Therefore, it is necessary for the action of health professionals in the care of the patient, from the hygiene of the professional to, the use of the catheter, when necessary to observe the real need for the use of antimicrobials and that this is done after culture and antibiogram.

La infección del tracto urinario (ITU) no es más que la afectación de las vías urinarias por un microorganismo. Entre las infecciones hospitalarias con mayor incidencia se encuentra la infección del tracto urinario, que afecta más a mujeres que a hombres. Una de las posibles causas de esta infección en pacientes en la unidad de cuidados intensivos (UCI) es el uso de una sonda vesical. Su tratamiento inadecuado puede causar pielonefritis, la cual puede ingresar al torrente sanguíneo, generando una infección sistémica y llevando al paciente a la muerte. La resistencia a los antimicrobianos es una de las principales dificultades encontradas en las UCI y se considera un problema de salud pública. El objetivo de este estudio fue presentar un breve informe, basado en la literatura, sobre la resistencia antimicrobiana en infecciones del tracto urinario en una unidad de cuidados intensivos de adultos. En ambientes hospitalarios, el principal microorganismo causante de ITU es Escherichia coli, y el 55,5% de los cultivos positivos están asociados a procedimientos invasivos, como sondas vesicales permanentes, por lo que este es el microorganismo más resistente a los antimicrobianos utilizados, como la ampicilina. ., trimetoprima y ciprofloxacino. El uso indiscriminado de antibióticos pone de relieve la necesidad de un análisis cuidadoso de la necesidad real de qué antimicrobianos utilizar, el momento de uso y la forma correcta de administración. Por lo tanto, es necesaria la actuación de los profesionales de la salud en el cuidado del paciente, desde la higiene del profesional, uso del catéter, cuando sea necesario observar la necesidad real del uso de antimicrobianos y que este se realice previo cultivo y antibiograma.

Monteverdia ilicifolia: um protetor gástrico / Monteverdia ilicifolia: a gastric protector / Monteverdia ilicifolia: protector gástrico

Monteverdia ilicifolia, conhecida popularmente como espinheira-santa, é uma planta da família Celastraceae de relevante ação terapêutica devido às suas propriedades medicinais, principalmente a sua atividade gastroprotetora, possuindo efeitos comprovados sobre acidez e úlceras estomacais. Desta forma o objetivo deste trabalho foi encontrar na literatura evidências para o uso terapêutico da M. ilicifolia, como uma alternativa frente aos fármacos sintéticos disponíveis na indústria farmacêutica voltados para o tratamento de problemas estomacais. Foi utilizado no presente trabalho a base de dados Google acadêmico. Os distúrbios estomacais afetam milhares de pessoas, influenciando de forma negativa na qualidade de vida da população e gerando prejuízos ao sistema de saúde. Os fármacos com atividade sobre a secreção da acidez gástrica são as medicações mais prescritas para essas enfermidades, destacando-se os antagonistas do receptor H2 de histamina e os inibidores da bomba de prótons, amplamente utilizados para o tratamento de úlceras e gastrite. Com o tempo, esses medicamentos passaram a ser indiscriminadamente utilizados, prática que põem em risco a saúde íntegra dos pacientes, mediante aos diversos efeitos adversos que esses medicamentos podem causar. As plantas medicinais têm sido aplicadas na terapia de diversas doenças em toda a história da humanidade. Nesse contexto, a espinheira-santa surge como uma alternativa segura e eficaz para a prevenção e tratamento dessas patologias. Dentre os compostos bioativos que podem desempenhar a atividade gastroprotetora, destacam-se os taninos, triterpenos e flavonóides. Os estudos analisados demonstram que a M. ilicifolia possui relevante ação terapêutica, com potencial para substituir os fármacos usualmente empregados no tratamento de úlceras e gastrite.

The Monteverdia ilicifolia, popularly known as espinheira-santa, is a plant of the Celastraceae's family with relevant therapeutic action due to its medicinal properties, mainly its gastroprotective activity, and possesses proven effects on acidity and stomach ulcers. The aim of this work was to find in the literature evidence for the therapeutic use of M. ilicifolia, as an alternative to the synthetic drugs available in the pharmaceutical industry for the treatment of stomach problems. The academic Google database was used in this work. Stomach disorders affect thousands of people, negatively influencing the population's quality of life and causing damage to the health system. The drugs with activity on gastric acid secretion are the most prescribed medications for these diseases, especially histamine H2 receptor antagonists and proton pump inhibitors, widely used for the treatment of ulcers and gastritis. Over time, these drugs began to be used indiscriminately, a practice that jeopardizes the health of patients, due to the various adverse effects that these drugs can cause. Medicinal plants have been applied in the therapy of various diseases throughout human history. In this context, the espinheira-santa emerges as a safe and effective alternative for the prevention and treatment of these pathologies. Among the bioactive compounds that can perform a gastroprotective activity, tannins, triterpenes, and flavonoids stand out. The analyzed studies demonstrate that M. ilicifolia has relevant therapeutic action, with the potential to replace the drugs usually used in the treatment of ulcers and gastritis.

Monteverdia ilicifolia, conocida popularmente como espinheira-santa, es una planta de la familia Celastraceae de relevante acción terapéutica por sus propiedades medicinales, principalmente su actividad gastroprotectora, con efectos probados sobre la acidez y las úlceras estomacales. Así, el objetivo de este trabajo fue encontrar evidencia en la literatura para el uso terapéutico de M. ilicifolia, como alternativa a las drogas sintéticas disponibles en la industria farmacéutica destinadas al tratamiento de problemas estomacales. En este trabajo se utilizó la base de datos académica de Google. Los trastornos estomacales afectan a miles de personas, influyendo negativamente en la calidad de vida de la población y provocando daños en el sistema de salud. Los fármacos con actividad sobre la secreción ácida gástrica son los más prescritos para estas enfermedades, especialmente los antagonistas de los receptores H2 de histamina y los inhibidores de la bomba de protones, muy utilizados para el tratamiento de úlceras y gastritis. Con el tiempo, estos medicamentos comenzaron a utilizarse de forma indiscriminada, práctica que pone en riesgo la salud de los pacientes, debido a los diversos efectos adversos que estos fármacos pueden ocasionar. Las plantas medicinales se han aplicado en la terapia de diversas enfermedades a lo largo de la historia humana. En este contexto, la espinheira-santa surge como una alternativa segura y eficaz para la prevención y el tratamiento de estas patologías. Entre los compuestos bioactivos que pueden realizar actividad gastroprotectora destacan los taninos, los triterpenos y los flavonoides. Los estudios analizados demuestran que M. ilicifolia tiene una acción terapéutica relevante, con potencial para reemplazar los fármacos habitualmente utilizados en el tratamiento de úlceras y gastritis.

Levantamento epidemiológico dos casos de tuberculose no Brasil e ações alternativas para auxiliar no tratamento / Epidemiological survey of tuberculosis cases in Brazil and alternative actions to aid in treatment / Estudio epidemiológico de los casos de tuberculosis en Brasil y acciones alternativas para ayudar al tratamiento

tuberculose é uma das doenças infectocontagiosas de maior importância no Brasil e no mundo. Afeta de forma importante populações em situação de vulnerabilidade social e econômica. O objetivo deste estudo foi realizar um levantamento do número de casos notificados de tuberculose no Brasil nos últimos 10 anos (2011 a 2021), avaliar os fatores que afetam a transmissão, bem como discutir o tratamento padrão e com fitoterápicos. O levantamento epidemiológico dos casos de tuberculose no Brasil de janeiro de 2011 a dezembro de 2021 foi realizado dentre os notificados pelo Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN). Os resultados indicaram um aumento linear de casos a partir de 2017 com 90.776 casos diagnosticados, em 2018 (94.720) e 2019 (96.655). Acredita-se que o aumento linear da tuberculose neste período pode estar relacionado principalmente com o aumento da pobreza, contudo o compartilhamento de utensílios durante o uso de narguilé podem representar fatores de risco para tuberculose. Seis plantas medicinais afetam diretamente as micobactérias (Chenopodium ambrosioides, Tetradenia riparia, Physalis angulata, Origanum vulgare, Eucalyptus globulus, Mikania glomerata) e cinco plantas com atividade antibacteriana auxiliam no trato respiratório (Nasturtium officinale, Allium sativum, Schinus terebinthifolius, Adiantum capillus-veneris, Allium cepa). Contudo, a tuberculose é uma doença reemergente sendo necessária a adoção de políticas públicas que intensifiquem e implementem medidas sócio-educativas para a implantação do uso de fitoterápicos como medida complementar.

Tuberculosis is one of the most important infectious diseases in Brazil and worldwide. It significantly affects populations in situations of social and economic vulnerability. This study aimed to survey the number of reported tuberculosis cases in Brazil in the last 10 years (2011 to 2021) to assess the factors that affect the transmission and discuss standard and herbal treatments. The epidemiological survey of tuberculosis cases in Brazil from January 2011 to December 2021 was carried out among those notified by the Notifiable Diseases Information System (SINAN). The results indicated a linear increase in cases from 2017, with 90,776 diagnosed cases, in 2018 (94,720) and 2019 (96,655). It is believed that the linear increase in tuberculosis in this period may be mainly related to the increase in poverty. However, the sharing of utensils during the use of hookah may represent risk factors for tuberculosis. Six medicinal plants directly affect mycobacteria (Chenopodium ambrosioides, Tetradenia riparia, Physalis angulata, Origanum vulgare, Eucalyptus globulus, Mikania glomerata), and five plants with antibacterial activity help in the respiratory tract (Nasturtium officinale, Allium sativum, Schinus terebinthifolius, Adiantum capillus-veneris, Allium cepa). However, tuberculosis is a re-emerging disease, and it is necessary to adopt public policies that intensify and implement socio-educational measures for using herbal medicines as a complementary measure.

La tuberculosis es una de las enfermedades infecciosas más importantes en Brasil y en el mundo. Afecta significativamente a las poblaciones en situación de vulnerabilidad social y económica. El objetivo de este estudio fue realizar una encuesta sobre el número de casos notificados de tuberculosis en Brasil en los últimos 10 años (2011 a 2021), para evaluar los factores que afectan a la transmisión, así como para discutir el tratamiento estándar y con fitoterapias. La encuesta epidemiológica de los casos de tuberculosis en Brasil desde enero de 2011 hasta diciembre de 2021 se realizó entre los notificados por el Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN). Los resultados indicaron un aumento lineal de casos desde 2017 con 90.776 casos diagnosticados, en 2018 (94.720) y 2019 (96.655). Se cree que el aumento lineal de la tuberculosis en este periodo puede estar relacionado principalmente con el aumento de la pobreza, aunque el hecho de compartir los utensilios durante el uso de la shisha puede representar factores de riesgo para la tuberculosis. Seis plantas medicinales afectan directamente a las micobacterias (Chenopodium ambrosioides, Tetradenia riparia, Physalis angulata, Origanum vulgare, Eucalyptus globulus, Mikania glomerata) y cinco plantas con actividad antibacteriana ayudan a las vías respiratorias (Nasturtium officinale, Allium sativum, Schinus terebinthifolius, Adiantum capillus-veneris, Allium cepa). Sin embargo, la tuberculosis es una enfermedad reemergente siendo necesaria la adopción de políticas públicas que intensifiquen e implementen medidas socioeducativas para la implementación del uso de fitoterápicos como medida complementaria.

Estudo do potencial antiviral sobre o Sars-Cov-2 dos compostos identificados no extrato bruto das folhas de Tetradenia riparia / Study of antiviral potential on Sars-Cov-2 of compounds identified in Tetradenia riparia leaves crude extract / Estudio del potencial antiviral sobre el Sars-Cov-2 de los componentes identificados en el extracto crudo de las hojas de Tetradenia riparia

A COVID-19 surgiu de forma repentina, acometendo milhões de pessoas e causando muitas mortes no mundo todo. Diante disso, torna-se necessário a busca de substâncias bioativas com propriedades antivirais. No Brasil, a espécie Tetradenia riparia foi inserida como planta ornamental exótica, com aroma intenso e agradável, sendo cultivada em parques, jardins, residenciais e hortos. O objetivo deste estudo foi identificar compostos presentes no extrato bruto das folhas de Tetradenia riparia com interesse antiviral. O extrato bruto das folhas secas foi obtido por maceração dinâmica por esgotamento do solvente e após, concentrado em evaporador rotativo. A composição química do extrato bruto foi analisada por cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas de alta resolução (UHPLC-ESI/qTOF). Foram identificados 31 compostos que foram investigados por meio de levantamento bibliográfico quanto ao seu potencial anti- SARS-CoV-2. Os compostos rosmanol, procianidina, cianidina, betulina, ácido betulínico e o ácido sagerínico, apresentaram potencial atividade antiviral sobre o SARS-CoV-2. Esta investigação é promissora, indicando possivelmente que no extrato bruto das folhas de T. ripária existem compostos que podem combater o SARS-CoV-2. Neste sentido, estudos de ancoramento molecular (docking) e análises in silico sobre a proteína Mpro do vírus devem ser realizadas corroborando desta forma a ação dos compostos identificados.

COVID-19 appeared suddenly, affecting millions of people and causing many deaths worldwide. Therefore, it is necessary to search for bioactive substances with antiviral properties. In Brazil, Tetradenia riparia was inserted as an exotic ornamental plant, with an intense and pleasant aroma, cultivated in parks, residential and vegetable gardens. This study aimed to identify compounds present in the crude extract of Tetradenia riparia leaves with antiviral interest. The crude extract of the dried leaves was obtained by dynamic maceration with solvent exhaustion and then concentrated in a rotary evaporator. The chemical composition of the crude extract was analyzed by ultra- performance liquid chromatography coupled with high-resolution mass spectrometry (UHPLC- ESI/qTOF). We identified 31 compounds investigated through a literature review for their anti- SARS-CoV-2 potential. The compounds rosmanol, procyanidin, cyanidin, betulin, betulinic acid, and sagerinic acid showed potential antiviral activity against SARS-CoV-2. Therefore, this investigation is promising, possibly indicating that in the crude extract of T. riparia leaves, there are compounds that can fight SARS-CoV-2. In this sense, molecular docking studies and in silico analyzes on the virus Mpro protein must be carried out, thus corroborating the action of the identified compounds.

SARS-CoV-19 ha aparecido repentinamente, afectando a millones de personas y causando muchas muertes en todo el mundo. Por ello, se hace necesaria la búsqueda de sustancias bioactivas con propiedades antivirales. En Brasil, la especie Tetradenia riparia ha sido introducida como planta ornamental exótica, con un aroma intenso y agradable, siendo cultivada en parques, jardines, residencias y centros de jardinería. El objetivo de este estudio fue identificar los compuestos presentes en el extracto crudo de las hojas de Tetradenia riparia con interés antiviral. El extracto crudo de las hojas secas se obtuvo por maceración dinámica por agotamiento del disolvente y después, se concentró en el evaporador rotatorio. La composición química del extracto crudo se analizó mediante cromatografía líquida de ultra rendimiento acoplada a espectrometría de masas de alto rendimiento (UHPLC-ESI/qTOF). Se identificaron 31 compuestos y se investigó su potencial anti-SARS-CoV-2 mediante un estudio bibliográfico. Los compuestos rosmanol, procianidina, cianidina, betulina, ácido betulínico y ácido sagerínico, mostraron una potencial actividad antiviral sobre el SARS-CoV-2. Esta investigación es prometedora, pues posiblemente indica que en el extracto crudo de las hojas de T. riparia hay compuestos que pueden combatir el SARS-CoV-2. En este sentido, deben realizarse estudios de docking y análisis in silico sobre la proteína Mpro del virus para corroborar la acción de los compuestos identificados.

Mycelial biomass cultivation of Lentinus crinitus / Crescimento micelial de Lentinus crinitus

Lentinus crinitus is a medicinal basidiomycete, little studied regarding the basic cultivation conditions, which is used in bioremediation and consumed by native Indians from the Brazilian Amazon. Also, it produces a fungal secondary metabolite panepoxydone that has been described as an essential regulator of the inflammatory and immune response. This study aimed to evaluate basic conditions of temperature, pH, and nitrogen concentration and source in the cultivation of L. crinitus mycelial biomass. In order to evaluate fungal growth temperature, 2% malt extract agar (MEA) medium, pH 5.5, was utilized from 19 to 40 °C. For pH, MEA had pH adjusted from 2 to 11 and cultivated at 28 °C. Urea or soybean meal was added to MEA to obtain final concentration from 0.5 and 16 g/L of nitrogen, pH of 5.5, cultivated at 28 °C. The best temperature growth varies from 31 to 34 ºC and the optimal one is 32.7º C, and the best pH ranges from 4.5 to 6.5 and the optimal one is 6.1. Protein or non-protein nitrogen concentration is inversely proportional to the mycelial biomass growth. Nitrogen concentrations of 2.0 g/L soybean meal and urea inhibit mycelial biomass growth in 11% and 12%, respectively, but high concentrations of 16.0 g/L nitrogen inhibit the growth in 46% and 95%, respectively. The fungus is robust and grows under extreme conditions of temperature and pH, but smaller adaptation with increasing nitrogen concentrations in the cultivation medium, mainly non-protein nitrogen.

Lentinus crinitus é um basidiomiceto medicinal consumido por índios nativos da Amazônia brasileira. Este fungo tem sido estudado quanto ao potencial de biorremediação de metais, mas ainda carece de estudos sobre às condições básicas de crescimento. L. crinitus produz panepoxidona - um metabólito secundário fúngico - descrito como regulador da resposta inflamatória e imune em células animais. Este trabalho teve como objetivo avaliar as condições básicas de temperatura, pH e concentração e fonte de nitrogênio para o crescimento micelial de L. crinitus. O fungo foi crescido em meio agar extrato de malte a 2% (MEA), pH 5,5 e mantido entre 19 e 40 °C. Para a avaliação de pH o MEA teve o pH ajustado de 2 a 11 e o crescimento foi realizado a 28 °C. As fontes de nitrogênio estudadas foram a uréia e o farelo de soja adicionado ao MEA para obter entre 0,5 a 16 g/L de nitrogênio, pH de 5,5, cultivado a 28 ° C. A melhor faixa temperatura para o crescimento micelial foi de 31 a 34 ºC com ótimo a 32,7 º C; a melhor faixa de pH de 4,5 a 6,5 e com ótimo de 6,1. A concentração de nitrogênio proteico ou não proteico é inversamente proporcional ao crescimento do fungo. Concentrações de nitrogênio de 2,0 g/L reduzem o crescimento da biomassa micelial em 11% e 12%, respectivamente e meios com nitrogênio de 16,0 g/L reduzem o crescimento em 46% e 95%, respectivamente. O fungo é robusto e cresce sob condições extremas de temperatura e pH, mas menor adaptação em meios com alta concentração de nitrogênio, principalmente não proteico.

Lentinus crinitus response to blue light on carbohydrate-active enzymes / Resposta de Lentinus crinitus à luz azul em enzimas ativas por carboidratos

Fungi are capable of sensing light from ultraviolet to far-red and they use light as a source of information about the environment anticipating stress and adverse conditions. Lentinus crinitus is a lignin-degrading fungus which produces laccase and other enzymes of biotechnological interest. The effect of blue light on fungal enzymatic activity has been studied; however, it has not been found studies on the effect of the blue light on carbohydrate-active enzymes and on mycelial biomass production of L. crinitus. We aimed to investigate carbohydrate-active enzymes activity and mycelial biomass production of L. crinitus cultivated under continuous illumination with blue light. L. crinitus was cultivated in malt extract medium in the dark, without agitation, and under continuous illumination with blue light-emitting diodes. The blue light reduced the total cellulase, pectinase and xylanase activities but increased the endoglucanase activity. Blue light reduced the mycelial growth of L. crinitus in 26% and the enzymatic activity-to-mycelial biomass ratio (U mg-1 dry basis) increased in 10% total cellulase, 33% endoglucanase, and 16% pectinase activities. Also, it is suggested that L. crinitus has a photosensory system and it could lead to new process of obtaining enzymes of biotechnological interest.

Fungos são capazes de sentir a luz com comprimentos de onda que variam do ultravioleta ao infravermelho e usam a luz como fonte de informação sobre o ambiente, antecipando condições adversas e de estresse. Lentinus crinitus é um fungo ligninolítico que produz lacase e outras enzimas de interesse biotecnológico. O efeito da luz azul na atividade enzimática de fungos já foi estudado, contudo, ainda não há estudos sobre o efeito da luz azul na produção de enzimas ativas sobre carboidratos (CAZymes, carbohydrate-active enzymes) e de biomassa micelial de L. crinitus. O objetivo deste estudo foi investigar a avitivade de CAZymes e a produção de biomassa micelial de L. crinitus cultivado sob iluminação continua com luz azul. L. crinitus foi cultivado em meio extrato de malte, sem agitação, na ausência de luz e sob luz continua fornecida por diodos emissores de luz azul. A luz azul reduziu a atividade de cellulase total, pectinase e xilanase, mas aumentou a atividade de endoglucanase. A luz azul reduziu o crescimento micelial de L. crinitus em 26% e aumentou a razão atividade enzimática/biomassa micelial (U mg-1 em base seca) de cellulase total em 10%, endoglucanase em 33% e pectinase em 16%. Além disso, sugere-se que L. crinitus possua um sistema fotossensorial que poderia ser explorado para a otimização de bioprocessos que visam a obtenção de enzimas de interesse biotecnológico.

Cryopreservation at -75 °C of Agaricus subrufescens on wheat grains with sucrose

Abstract Agaricus subrufescens is a basidiomycete which is studied because of its medicinal and gastronomic importance; however, less attention has been paid to its preservation. This study aimed to evaluate the effect of sucrose addition to substrate and cryotube on the viability of Agaricus subrufescens cryopreserved at -20 °C and at -75 °C for one and two years. Zero, 10% or 20% sucrose was added to potato dextrose agar or wheat grain. The mycelia were cryopreserved in the absence of cryoprotectant or with sucrose solutions at 15%, 30% or 45%. After one or two years at -75 °C or at -20 °C, mycelia were thawed and evaluated about viability, initial time of growth, colony diameter and genomic stability. Cryopreservation at -20 °C is not effective to keep mycelial viability of this fungus. Cryopreservation at -75 °C is effective when sucrose is used in substrates and/or cryotubes. Without sucrose, cryopreservation at -75 °C is effective only when wheat grains are used. Physiological characteristic as mycelial colony diameter is negatively affected when potato dextrose agar is used and unaffected when wheat grain is used after two-year cryopreservation at -75 °C. The fungus genome does not show alteration after two-year cryopreservation at -75 °C.

Long-term cryopreservation of basidiomycetes

Abstract Basidiomycetes have several biotechnological and industrial applications such as enzyme production, bioremediation, pharmaceutical and functional food production. Due to climatic features, the preservation of several basidiomycetes is threatened, and to guarantee the preservation of this genetic resource, the development of long-term preservation techniques is necessary once there is no universal protocol for the cryopreservation of basidiomycetes. Cryopreservation is a technique in which microorganisms are submitted to ultralow temperatures. Therefore, this study aimed to collect information on the main conditions for long-term cryopreservation of basidiomycetes in the last 20 years. Scientific articles on cryopreservation of basidiomycetes published from 1997 to 2016, were researched, and only the studies on two intervals of cryopreservation were considered: from 1 to 2 years and for longer than 2 years. The analyzed conditions of basidiomycete cryopreservation were: most studied genera, cryopreservation temperature, substrate, cryoprotectant (and preservation substrate), cryopreservation period, thawing temperature and cultivation medium after thawing, physiological and genetic stability of basidiomycetes after thawing in cryopreservation. In this review, the viability of the main cryopreservation conditions of basidiomycetes studied in the last 20 years are presented and discussed.

Interação entre nematicidas e herbicidas pré-emergentes no desenvolvimento inicial da cultura da cana-de-açúcar / Interaction between nematicides and pre-emergent herbicide in the initial development of sugar cane / Interacción entre nematicidas y herbicidas pre emergentes en el desarrollo inicial de la cultura de caña de azúcar

O objetivo do trabalho foi avaliar a interação do herbicida tebuthiuron (Combine® 500 SC), com nematicidas carbofuram (Furadan® 350 SC) e benfuracarbe (Pottente®), aplicados no plantio da cultura da cana-de-açúcar (RB 867515). O experimento foi conduzido em casa de vegetação da Universidade Paranaense, em Umuarama ­ PR, no período de abril a agosto de 2014. Foi instalado em vasos com capacidade para 4,5 L, contendo uma planta por vaso, em delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos e quatro repetições, sendo os tratamentos testemunha (T1), sem aplicação de produtos; aplicação isolada de carbofuran (T2); aplicação isolada de benfuracarbe (T3); aplicação isolada de tebuthiuron (T4); aplicação combinada de carbofuran e tebuthiuron (T5) e aplicação combinada de benfuracarbe e tebuthiuron (T6). O experimento foi submetido a duas avaliações, 45 e 90 dias após o plantio (DAP) sendo que na primeira, as variáveis avaliadas foram altura da parte aérea, número de folhas e número de plantas daninhas por vaso, e, na segunda, altura da parte aérea; número de folhas; número de plantas daninhas; massa fresca e seca da parte aérea; massa fresca do sistema radicular; população final total de nematoides por vaso, calculada pelo somatório de nematoides nas raízes e solo. Quanto ao número de folhas, o tratamento T4 demonstrou fitotoxicidade aos 45 DAP. Os tratamentos T3, T5 e T6 apresentaram as maiores massa fresca e seca da parte área da cana, demonstraram ausência de interação antagônica entre as combinações do herbicida com os nematicidas aos 90 DAP. Os tratamentos T3 e T5 foram eficientes no controle populacional de P. zeae.(AU)

The aim of the study was to evaluate the interaction of the herbicide tebuthiuron (Combine® SC 500), with the following nematicides: carbofuran (350 Furadan® SC) and benfuracarb (Pottente®) applied during the planting of cane sugar (RB 867515). The experiment was conducted in a greenhouse at Universidade Paranaense in Umuarama - PR, from April to August 2014. The crop was started in 4.5-L vases containing one plant per vase, in a completely randomized design with six treatments and four replications, namely control treatments (T1), with no application of products; isolated application of carbofuran (T2); isolated application of benfuracarb (T3); isolated application of tebuthiuron (T4); combined application of carbofuran and tebuthiuron (T5) and combined application of benfuracarb and tebuthiuron (T6). The experiment was submitted to two assessments, at 45 and 90 days after planting (DAP). On the first assessment, the variables analyzed were shoot height, number of leaves and number of weeds per vase. The second assessment analyzed shoot height; number of leaves; number of weeds; fresh and dry weight of shoot; fresh weight of the root system; total final population of nematodes per vase, calculated by the sum of nematodes in the roots and soil. Regarding the number of leaves, the T4 treatment showed phytotoxicity at 45 DAP. The T3, T5 and T6 treatments had the highest fresh and dry weight of the aerial part of the sugar cane; with absence of antagonistic interaction between the combinations of herbicide and nematicides at 90 DAP. The T3 and T5 treatments were effective in controlling the population of P. zeae.(AU)

El objetivo del estudio ha sido evaluar la interacción del herbicida tebuthiuron (Combine® 500 SC), con nematicidas carbofuram (Furadan® 350 SC) y benfuracarbe (Pottente®), aplicados en plantío de caña de azúcar (RB 867515). El experimento ha sido dirigido en el área de vegetación de la Universidad Paranaense, en Umuarama - PR, en el período de abril a agosto de 2014. Se ha instalado en floreros con capacidad para 4,5 L, conteniendo una planta por florero, en delineamiento enteramente casualizado, con seis tratamientos y cuatro repeticiones, siendo los tratamientos testigo (T1), sin aplicación de productos; aplicación aislada de carbofuran (T2); aplicación aislada de benfuracarbe (T3); aplicación aislada de tebuthiuron (T4); aplicación combinada de carbofuran y tebuthiuron (T5) y aplicación combinada de benfuracarbe y tebuthiuron (T6). El experimento ha sido sometido a dos evaluaciones, 45 y 90 días después del plantío (DAP) siendo que en la primera, las variables evaluadas fue la altura de la parte aérea, número de hojas y el número de plantas dañinas por florero, y, en la segunda, altura de la parte aérea, número de hojas, número de plantas dañinas; masa fresca y seca de la parte aérea; masa fresca del sistema radicular; población final total de nematodos por florero, calculado por la suma de nematodos en las raíces y suelo. Cuanto al número de hojas, el tratamiento T4 demostró citotoxicidad a los 45 DAP. Los tratamientos T3, T5 y T6 presentaron mayor masa fresca y seca en la parte aérea de la caña, demostraron ausencia de interacción antagónica entre las combinaciones de los herbicidas con los nematicidas a los 90 DAP. Los tratamientos T3 y T5 fueron eficientes en el control poblacional de P. zeae.(AU)

Utilização de óleo essencial de duas variedades de laranja na eclosão de Meloidogyne javanica / Use of essential oil from two varieties of orange in the hatching of Meloidogyne javanica / Utilización de aceite esencial de dos variedades de naranja en la eclosión de Meloidogyne javanica

O Brasil é o maior produtor de laranja do mundo. Cultura rica em óleos essenciais de ampla aplicação, como no controle de pragas e patógenos, dentre eles os fitonematoides, causadores de prejuízos relevantes à agricultura. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar a porcentagem de eclosão de juvenis de M. javanica submetidos à diferentes concentrações de óleos essenciais de duas variedades de laranja, Pêra Rio e Folha Murcha, em condições in vitro. Os óleos essenciais foram extraídos das variedades de laranja (Citrus sinensis) Pêra Rio e Folha Murcha, pela técnica de hidrodestilação. O experimento foi instalado em arranjo fatorial 2X8, DIC, sendo oito concentrações (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 e 500 µg mL-1) e dois tipos de OE, avaliados em três períodos (4 e 16 dias). Em cada unidade experimental, tubos de ensaio 10x75 mm, adicionou-se 1 mL de suspensão de nematoides contendo 50 ovos e 1 mL de emulsão para cada concentração, avaliando-se a porcentagem de juvenis eclodidos. As concentrações dos óleos essenciais das variedades influenciaram (p≤0,05) na porcentagem de eclosão de juvenis de M. javanica, em todos os períodos avaliados. Para a maioria das concentrações, aos quatro e 16 dias, o óleo essencial da var. Pêra Rio foi mais eficiente na redução da eclosão, quando comparado a var. Folha Murcha.(AU)

Brazil is the largest producer of oranges in the world. This crop is rich in essential oils which are used in a wide range of applications, such as controlling pests and pathogens. Phytonematodes are among such pests, and are responsible for causing harmful damages to agriculture. Thus, the purpose of this study was to evaluate the percentage of hatching of M. javanica juveniles submitted to different concentrations of orange essential oil under in-vitro conditions. Oils were extracted from two varieties of orange (Citrus sinensis) popularly known in Brazil as Pera Rio and Folha Murcha, using the hydro-distillation technique. The experiment was carried out in a 2X8 factorial arrangement, at eight concentrations (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 and 500 µg mL-1) and two types of essential oils, evaluated in two periods (4 and 16 days). In each experimental unit, 10x75-mm test tubes received 1-mL nematode suspension containing 50 eggs and 1-mL of emulsion added for each concentration. Then, the percentage of hatched juveniles was evaluated. The concentration of essential oils from the varieties influenced (p≤0.05) the percentage of hatching of M. javanica juveniles in all evaluated periods. For most concentrations, at 4 and 16 days, the Pera Rio variety was more efficient at reducing hatching when compared to the Folha Murcha variety.(AU)

Brasil es el mayor productor de naranja del mundo. Cultura rica en aceites esenciales de amplia aplicación, como en el control de plagas y patógenos, entre ellos los fitonematodos, causantes de perjuicios relevantes a la agricultura. Así, el objetivo del trabajo fue evaluar el porcentaje de eclosión de juveniles de M. javanica sometidos a diferentes concentraciones de aceites esenciales de dos variedades de naranja, Pera Río y Hoja Mustia, en condiciones in vitro. Los aceites esenciales fueron extraídos de las variedades de naranja (Citrus sinensis) Pera Río y Hoja Mustia, por la técnica de hidrodestilación. El experimento fue instalado en un arreglo factorial 2x8, DIC, siendo ocho concentraciones (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 y 500 µg mL-1) y dos tipos de OE, evaluados en tres períodos (4 y 16 días). En cada unidad experimental, tubos de ensayo 10x75 mm, se añadieron 1 mL de suspensión de nematodos conteniendo 50 huevos y 1 mL de emulsión para cada concentración, evaluando el porcentaje de juveniles eclosionados. Las concentraciones de los aceites esenciales de las variedades influenciaron (p≤0,05) en el porcentaje de eclosión de juveniles de M. javanica, en todos los períodos evaluados. Para la mayoría de las concentraciones, a los cuatro y 16 días, el aceite esencial de la var. Pera Río fue más eficiente en la reducción de la eclosión, cuando comparado a var. Hoja Mustia.(AU)

Atividade residual e carência irregular do ácido diclorofenoxiacético (2, 4-d) no desenvolvimento inicial da soja / Residual activity and irregular depletion of dichlorophenoxyactic acid (2, 4-d) in the early development of soybean / Actividad residual y carencia irregular del ácido diclorofenoxiacético (2, 4-d) en el desarrollo inicial de la soja

O 2,4-D (ácido diclorofenoxiacético) é amplamente utilizado no controle seletivo, pós-emergência, de plantas de folha estreita, como trigo, milho, arroz, entre outras. Contudo seu uso indiscriminado pode ocasionar problemas no desenvolvimento da cultura. O objetivo do trabalho foi avaliar os danos causados pelo uso inadequado do 2,4-D no desenvolvimento inicial da soja (Glycine max). Os tratamentos consistiram na combinação de cinco períodos de carência: um, quatro, oito, 12 e 15 dias antes da semeadura da soja e duas doses de aplicação: a dose recomendada e a dose duplicada (L/ha), consistindo em um esquema fatorial 5x2 com três repetições. As plantas foram cultivadas por 44 dias, e em seguida coletadas e analisadas quanto à taxa de germinação (%), número de rebrota, índice de clorofila, comprimento de raiz e parte aérea (cm), massa seca e fresca (g). A dose duplicada revelou maior efeito sobre todas as variáveis analisadas, reduzindo em 20% a porcentagem de emergência. O índice de clorofila decresceu quando comparados o menor período de carência (um dia) e o maior (15 dias), e na dose duplicada. A massa seca também foi superior na dose recomendada, assim como o comprimento da raiz e da parte aérea. Os períodos de carência de um, quatro e oito dias foram os que mais influenciaram o crescimento da raiz.

Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) is widely used in the selective, post-emergence control of narrow-leaf plants such as wheat, corn, and rice, among others. However, its uncontrolled use can cause problems in the development of the crop. The purpose of this paper was to evaluate the damage caused by the inadequate use of 2,4-D in the early development of soybean (Glycine max). The treatments consisted of a combination of five grace periods: 1, 4, 8, 12 and 15 days before sowing; and two application doses: the recommended dose and a duplicate dose (L/ha), consisting of a factorial matrix of 5x2, with three replicates. The plants were cultivated for 44 days, then collected and analyzed for germination rate (%), regrowth number, chlorophyll index, root and shoot length (cm), dry and fresh mass (g). The duplicate dose showed a greater effect on all analyzed variables, reducing the emergency percentage by 20%. The chlorophyll index decreased when compared to the shortest (1 day) and longest (15 days) grace periods, and in the duplicate dose. Dry mass was also higher when using the recommended dose, as well as the root and shoot length. Grace periods of 1, 4 and 8 days were the ones that were most influenced the root growth.

El 2,4-D (ácido diclorofenoxiacético) es ampliamente utilizado en el control selectivo, pos emergencia, de plantas de hoja estrecha, como trigo, maíz, arroz, entre otras. Sin embargo, su uso indiscriminado puede ocasionar problemas en el desarrollo de la cultura. El objetivo del trabajo fue evaluar los daños causados por el uso inadecuado del 2,4-D en el desarrollo inicial de la soja (Glycine max). Los tratamientos consistieron en la combinación de cinco períodos de carencia: 1, 4, 8, 12 y 15 días antes de la siembra de la soja y dos dosis de aplicación: la dosis recomendada y la dosis duplicada (L/ha), consistente en un esquema factorial 5x2 con tres repeticiones. Las plantas fueron cultivadas por 44 días, y luego recolectadas y analizadas en cuanto a la tasa de germinación (%), número de rebrote, índice de clorofila, longitud de raíz y parte aérea (cm), masa seca y fresca (g). La dosis duplicada reveló un mayor efecto sobre todas las variables analizadas, reduciendo en un 20% el porcentaje de emergencia. El índice de clorofila disminuyó cuando se comparó el menor período de carencia (1 día) y el mayor (15 días), y en la dosis duplicada. La masa seca también fue superior en la dosis recomendada, así como la longitud de la raíz y de la parte aérea. Los períodos de carencia de 1, 4 y 8 días fueron los que más influenciaron el crecimiento de la raíz.

Produção de lacase de Pycnoporus sanguineus em meio de cultivo à base de melaço soja / Laccase production by Pycnoporus sanguineus in culture media with soybean molasses / Producción de lacasa de Pycnoporus sanguineus en medio de cultivo con melaza de soja

Lacases são polifenol oxidases que utilizam a capacidade redox de íons cobre para reduzir oxigênio a água e oxidar um substrato fenólico. A síntese e secreção de lacases de basidiomicetos dependem de vários fatores como os nutrientes presentes no meio de cultura. Visando à produção de lacase, Pycnoporus sanguineus foi cultivado em meio contendo melaço de soja como única fonte de carbono, ureia como fonte de nitrogênio suplementar em diferentes concentrações (0,6; 1,2; 2,4; 4,8 e 9,6 g/L de nitrogênio) e diferentes concentrações de CuSO4 (0, 150, 200, 250 e 300 µM). O extrato enzimático produzido nas melhores condições de cultivo foi utilizado para a descoloração dos corantes remazol azul brilhante R (antraquinona), amarelo 145, preto 5, vermelho 195 (azo) e verde malaquita (trifenilmetano). As concentrações de nitrogênio não afetaram a produção de lacase, exceto a maior concentração (9,6 g/L) que reduziu a atividade enzimática. A adição de cobre ao meio de cultivo (150 µM) aumentou a atividade de lacase em 112%. A maior atividade de lacase (~34300 U/L) promoveu a descoloração dos corantes remazol azul brilhante R (67,5%) e verde malaquita (28,3%) em 24h, sendo os corantes azo descoloridos apenas parcialmente. Concluiu-se que o melaço de soja é um resíduo agroindustrial adequado para produção de lacase de P. sanguineus com potencial para degradação de corantes.

Laccases are multicopper oxidases using the redox ability from copper ions to reduce oxygen to water, while oxidizing a phenolic substrate. Laccase synthesis and secretion in basidiomycetes depend on the conditions provided and on the nutrients present in the culture medium. Pycnoporus sanguineus was cultivated in medium containing soybean molasses as the sole carbon source, with urea as the source of supplemental nitrogen at different concentrations (0.6, 1.2, 2.4, 4.8 and 9.6 g/L nitrogen), and different CuSO4 concentrations (0, 150, 200, 250 and 300 µM). The enzymatic extract produced under the best cultivation conditions was used for the depigmentation of remazole brilliant blue R (anthraquinone), yellow 145, black 5, red 195 (azo) and malachite green (triphenylmethane). Nitrogen concentrations did not affect laccase production, except for the higher concentration (9.6 g/L) reducing enzymatic activity. The addition of copper to the culture medium (150 µM) increased laccase activity by 112%. The highest laccase activity (~34300 U/L) promoted the depigmentation of remazol brilliant blue R (67.5%) and malachite green (28.3%) dyes in 24 hours. Azo dyes were only partially discolored. Therefore, it can be considered that soybean molasses is an agro-industrial byproduct suitable for the production of P. sanguineus laccase with potential for dye degradation.

Lacasas son polifenoles oxidasas que utilizan la capacidad redox de iones de cobre para reducir el oxígeno del agua y oxidar un sustrato fenólico. La síntesis y secreción de lacasas de basidiomicetos dependen de las condiciones como los nutrientes presentes en el medio de cultura. Buscando la producción de lacasa, se cultivó Pycnoporus sanguineus en medio que contenía melaza de soja como única fuente de carbono, urea como fuente de nitrógeno suplementar a diferentes concentraciones (0,6, 1,2, 2,4, 4,8 y 9,6 g/L de nitrógeno) y diferentes concentraciones de CuSO4 (0, 150, 200, 250 y 300 µM). El extrato enzimático producido en mejores condiciones de cultivo ha sido utilizado para la decoloración de los colorantes remazol azul brillante R (antraquinona), amarillo 145, negro 5, rojo 195 (azoico) y verde malaquita (trifenilmetano). Las concentraciones de nitrógeno no afectaron la producción de lacasa, excepto la mayor concentración (9,6 g/L) que redujo la actividad enzimática. La adición de cobre al medio de cultivo (150 µM) aumentó la actividad de la lacasa en un 112%. La mayor actividad de lacasa (~34300 U/L) promovió la decoloración de los colorantes remazol azul brillante R (67,5%) y verde malaquita (28,3%) en 24h, siendo que los colorantes azoicos fueran parcialmente decolorados. Se concluye que la melaza de soja es un desecho agroindustrial adecuado para la producción de lacasa de P. sanguineus con potencial para degradación de colorantes.

Atividade antimicrobiana de óleos essenciais de plantas medicinais / Actividad antimicrobiana de aceites esenciales de plantas medicinales / Antimicrobial activity of medicinal plant essential oils

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana dos óleos essenciais de Lippia alba (erva-cidreira-brasileira), Mentha piperita (hortelã-pimenta), Ocimum gratissimum (alfavaca-cravo) e Rosmarinus officinalis (alecrim) para Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. Os óleos essenciais foram obtidos de folhas por hidrodestilação. O rendimento de extração do óleo em mL kg-1 foi de 1,5; 1,9; 2,0 e 2,3 para L. alba; M. piperita; O. gratissimum e R. officinalis, respectivamente. Os micro-organismos foram padronizados a 0,5 na escala McFarland e crescidos em ágar Mueller-Hinton. Discos de papel embebidos nos óleos essenciais foram posicionados na superfície do meio de cultivo e os halos de inibição do crescimento foram medidos. Os óleos essenciais, principalmente de L. alba e O. gratissimum, demonstraram alto potencial inibitório sobre o crescimento dos micro-organismos avaliados, com exceção de P. aeruginosa que apresentou alta resistência à presença dos óleos essenciais.

In the present investigation, antimicrobial activity of four different plant essential oils - Lippia alba, Mentha piperita, Ocimum gratissimum and Rosmarinus officinalis - have been evaluated against Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. The essential oils were obtained from leaves by hydrodistillation. The yield of oil extraction in mL kg-1 was 1.5, 1.9, 2.0 and 2.3 for L. alba, M. piperita, O. gratissimum and R. officinalis, respectively. The microorganisms were standardized at 0.5 in the McFarland scale and grown in Mueller-Hinton agar. Paper discs soaked in the essential oils were placed on the surface of the culture medium and the growth inhibition zones were measured. The essential oils, especially L. alba and O. gratissimum, showed high inhibitory potential on microorganisms, except for P. aeruginosa, which showed high resistance to the presence of essential oils.

El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antimicrobiana de los aceites esenciales de Lippia alba (lemongrass-brasileña), Mentha piperita (menta), Ocimum gratissimum (albahaca, clavo de olor) y Rosmarinus officinalis (romero) para el control de Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa. Los aceites esenciales se obtuvieron a partir de hojas por hidrodestilación. El rendimiento de la extracción de aceite esencial en mL kg-1 fue de 1.5, 1.9, 2.0 y 2.3 para L. alba, M. piperita, O. gratissimum y R. officinalis, respectivamente. Los microorganismos fueron estandarizados a 0.5 en la escala de McFarland y cultivados en agar Mueller-Hinton. Discos de papel empapados en los aceites fueron colocados en la superficie del medio de cultivo y se midieron los halos de inhibición del crecimiento. Los aceites esenciales, especialmente de L. alba y O. gratissimum, mostraron alto potencial inhibitorio sobre el crecimiento de los microorganismos, excepto para P. aeruginosa, que mostró alta resistencia a la presencia de aceites esenciales.

Microscopia de epifluorescência para a determinção de biomassa micelial em substrato de cultivo sólido particulado / Microscopía e epifluorescencia para la deteminación de biomasa micelial en sustrato de cultivo sólido particulado / Epifluorscence mmicroscopy for the deterination of mycelial biomass in particulated solid substrate cultivatoon

A determinação de biomassa micelial fúngica crescida em substratos de cultivo sólido particulado (SCSP) é ainda um desafio devido à dificuldade de separação do micélio e o substrato. O objetivo deste trabalho foi avaliar a técnica de microscopia de epifluorescência para determinação da biomassa micelial de Pleurotus ostreatus em SCSP. Para determinação da exatidão da metodologia P. ostreatus foi crescido em meio líquido de extrato de malte e; a biomassa micelial foi separada por centrifugação, liofilizada e moída. Concentrações conhecidas do pó do micélio foram misturadas ao SCSP, composto de bagaço de cana de açúcar e fibra de soja, previamente autoclavado. Em seguida, a biomassa micelial foi determinada por microscopia de epifluorescência. Para promover a variação da biomassa micelial a ser determinada por microscopia de epifluorescência, SCSP adicionado de diferentes concentrações de ferro foram utilizados para o crescimento do fungo. Concluiu-se que a técnica apresenta baixa precisão e exatidão, o que implica na necessidade de maiores estudos para aplicação desta técnica para a determinação de biomassa micelial crescida em SCSP.

Determination of fungal mycelial biomass grown on solid substrate cultivation (SSC) is still a challenge due to the difficulty in separating mycelium and substrate. The objective of this study was to evaluate the epifluorescence microscopy to determine the mycelial biomass of Pleurotus ostreatus grown in SSC. P. ostreatus was grown in malt extract liquid medium and mycelial biomass was separated by centrifugation. It was then lyophilized and milled. Mycelial powder was added at known concentrations to SSC composed of sugarcane bagasse and soy fiber, previously autoclaved. Mycelial biomass was determined by epifluorescence microscopy. In order to promote mycelial biomass variation for the determination by epifluorescence microscopy, SSC added at different iron concentrations was used for fungus growth. It was concluded that the technique has low precision and accuracy, which implies the need for further studies in order to apply this technique for the determination of mycelial biomass grown in SSC.

Produção de lacase de fungos basidiomicetos por fermentação submersa com cascas de café / Produccin de lacase de hongos basidiomicetos por fermentación sumergida con cáscaras de café / Laccase production from basidiomycetes by submerged fermentation with coffee hukss

Cascas de café são fonte de carboidratos e nutrientes que podem ser bioconvertidos em produtos de interesse como enzimas. Lacases são cobre polifenol oxidases que oxidam compostos fenólicos, enquanto reduzem oxigênio molecular à água e; sua baixa especificidade a substratos permite sua aplicação em várias áreas como indústria têxtil, de alimentos e biorremediação. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a capacidade de produção de lacase de três linhagens de fungos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 e Pleurotus florida U6/10) por fermentação submersa com cascas de café e avaliar o uso de cobre como indutor dessa enzima. A casca de café mostrou ser um bom substrato para produção de lacases e das três linhagens testadas Pleurotus ostreatus (U6/9) foi a mais produtiva (22,5 U mL-1). A melhor fonte de nitrogênio para produção de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) foi o extrato de levedura na concentração de 9 g/L (20 U mL-1). A adição de 150 µM de CuSO4 resultou na indução significativa na produção de lacases nessa linhagem (21 U mL-1)no 12° dia de cultivo.

Coffee husks are a source of carbohydrates and nutrients that may be bioconverted into products of interest, such as enzymes. Laccases are copper polyphenol oxidases that oxidize phenolic compounds while reducing molecular oxygen to water. Laccase?s low specificity to substrates allows its application in several areas such as textiles, food processing and bioremediation industries. The aims of this study were to evaluate the potential to produce laccase from three strains of basidiomycetous fungi (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9, and Pleurotus florida U6/10) by submerged fermentation with coffee husks, and to evaluate the use of copper as an inducer of the enzyme. Coffee husk proved to be a good substrate for laccase production, with Pleurotus ostreatus (U6/9) being the most productive strain (22.5 U mL-1). The best source of nitrogen for laccase production of Pleurotus ostreatus (U6/9) was yeast extract 9 g/L (20 U mL-1). The addition of CuSO4 (150 µM) resulted in significant induction of laccase (21 U mL-1) on the 12th day of cultivation.

Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, tales como enzimas. Lacases son cobre polifenol oxidasas que oxidan compuestos fenólicos, mientras reducen el oxígeno molecular a el agua y; su baja especificidad a sustratos permite su aplicación en diversas áreas, como la industria textil, de alimentos y de biorremediación. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la capacidad de producción de lacase de tres linajes de hongos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 y Pleurotus florida U6/10) por fermentación sumergida con cáscaras de café, y evaluar el uso del cobre como inductor de esta enzima. La cáscara de café resultó ser un buen sustrato para la producción de lacases y, de las tres linajes probadas, Pleurotus ostreatus (U6/9) fue la más productiva (22,5 U mL-1). La mejor fuente de nitrógeno para la producción de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) fue el extracto de levadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 µM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de la producción de lacases en esa linaje (21 U mL-1), en el 12º día de cultivo.

Microscopia de epifluorescência para a determinação de biomassa micelial em substrato de cultivo sólido particulado / Epifluorescense microscopy for the determination of mycelial biomass in particulated solid substrate cultivation / Microscopia de pifluorescencia para la determinación de biomasa micelial en sustrato de cultivo solido particulado

A determinação de biomassa micelial fúngica crescida em substratos de cultivo sólido particulado (SCSP) é ainda um desafio devido à dificuldade de separação do micélio e o substrato. O objetivo deste trabalho foi avaliar a técnica de microscopia de epifluorescência para determinação da biomassa micelial de Pleurotus ostreatus em SCSP. Para determinação da exatidão da metodologia P. ostreatus foi crescido em meio líquido de extrato de malte e; a biomassa micelial foi separada por centrifugação, liofilizada e moída. Concentrações conhecidas do pó do micélio foram misturadas ao SCSP, composto de bagaço de cana de açúcar e fibra de soja, previamente autoclavado. Em seguida, a biomassa micelial foi determinada por microscopia de epifluorescência. Para promover a variação da biomassa micelial a ser determinada por microscopia de epifluorescência, SCSP adicionado de diferentes concentrações de ferro foram utilizados para o crescimento do fungo. Concluiu- -se que a técnica apresenta baixa precisão e exatidão, o que implica na necessidade de maiores estudos para aplicação desta técnica para a determinação de biomassa micelial crescida em SCSP.

Determination of fungal mycelial biomass grown on solid substrate cultivation (SSC) is still a challenge due to the difficulty in separating mycelium and substrate. The objective of this study was to evaluate the epifluorescence microscopy to determine the mycelial biomass of Pleurotus ostreatus grown in SSC. P. ostreatus was grown in malt extract liquid medium and mycelial biomass was separated by centrifugation. It was then lyophilized and milled. Mycelial powder was added at known concentrations to SSC composed of sugarcane bagasse and soy fiber, previously autoclaved. Mycelial biomass was determined by epifluorescence microscopy. In order to promote mycelial biomass variation for the determination by epifluorescence microscopy, SSC added at different iron concentrations was used for fungus growth. It was concluded that the technique has low precision and accuracy, which implies the need for further studies in order to apply this technique for the determination of mycelial biomass grown in SSC.

La determinación de biomasa micelial fúngica crecida en sustratos de cultivo sólido particulado (SCSP) es todavía un reto debido a la dificultad de separación del micelio y el sustrato. El objetivo de este estudio fue evaluar la técnica de microscopía de epifluorescencia para determinación de la biomasa micelial de Pleurotus ostreatus en SCSP. Para determinación de exactitud de la metodología P. ostreatus se cultivó en medio líquido de extracto de malta y; la biomasa micelial separada por centrifugación, liofilizada y molida. Concentraciones conocidas del polvo del micelio fueron mezcladas al SCSP, compuesto de bagazo de caña de azúcar y fibra de soya, previamente tratado en autoclave. A continuación, la biomasa micelial a ser determinada por microscopía de epifluorescencia. Para promover la variación de la biomasa micelial a ser determinada por microscopía de epifluorescencia, SCSP añadida con diferentes concentraciones de hierro fueron utilizados para el crecimiento del hongo. Se concluye que la técnica presenta baja precisión y exactitud, lo que implica en la necesidad de realizar más estudios para aplicación de esta técnica para la determinación de biomasa micelial crecida en SCSP.

Produção de lacase de fungos basidiomicetos por fermentação submersa com cascas de café / Laccase production from basidiomycetes by submerged fermentation with coffee hurks / Producción de lacase de hongos basidiomicetos por fermentación sumergida con cascaras de café

Cascas de café são fonte de carboidratos e nutrientes que podem ser bioconvertidos em produtos de interesse como enzimas. Lacases são cobre polifenol oxidases que oxidam compostos fenólicos, enquanto reduzem oxigênio molecular à água e; sua baixa especificidade a substratos permite sua aplicação em várias áreas como indústria têxtil, de alimentos e biorremediação. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a capacidade de produção de lacase de três linhagens de fungos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 e Pleurotus florida U6/10) por fermentação submersa com cascas de café e avaliar o uso de cobre como indutor dessa enzima. A casca de café mostrou ser um bom substrato para produção de lacases e das três linhagens testadas Pleurotus ostreatus (U6/9) foi a mais produtiva (22,5 U mL-1). A melhor fonte de nitrogênio para produção de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) foi o extrato de levedura na concentração de 9 g/L (20 U mL-1). A adição de 150 μM de CuSO4 resultou na indução significativa na produção de lacases nessa linhagem (21 U mL-1) no 12° dia de cultivo.

Coffee husks are a source of carbohydrates and nutrients that may be bioconverted into products of interest, such as enzymes. Laccases are copper polyphenol oxidases that oxidize phenolic compounds while reducing molecular oxygen to water. Laccase’s low specificity to substrates allows its application in several areas such as textiles, food processing and bioremediation industries. The aims of this study were to evaluate the potential to produce laccase from three strains of basidiomycetous fungi (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9, and Pleurotus florida U6/10) by submerged fermentation with coffee husks, and to evaluate the use of copper as an inducer of the enzyme. Coffee husk proved to be a good substrate for laccase production, with Pleurotus ostreatus (U6/9) being the most productive strain (22.5 U mL-1). The best source of nitrogen for laccase production of Pleurotus ostreatus (U6/9) was yeast extract 9 g/L (20 U mL-1). The addition of CuSO4 (150 μM) resulted in significant induction of laccase (21 U mL-1) on the 12th day of cultivation.

Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, tales como enzimas. Lacases son cobre polifenol oxidasas que oxidan compuestos fenólicos, mientras reducen el oxígeno molecular a el agua y; su baja especificidad a sustratos permite su aplicación en diversas áreas, como la industria textil, de alimentos y de biorremediación. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la capacidad de producción de lacase de tres linajes de hongos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 y Pleurotus florida U6/10) por fermentación sumergida con cáscaras de café, y evaluar el uso del cobre como inductor de esta enzima. La cáscara de café resultó ser un buen sustrato para la producción de lacases y, de las tres linajes probadas, Pleurotus ostreatus (U6/9) fue la más productiva (22,5 U mL-1). La mejor fuente de nitrógeno para la producción de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) fue el extracto de levadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 μM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, evadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 μM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de la producción de lacases en esa linaje (21 U mL-1), en el 12º día de cultivo.

Seleção de basidiomicetos proteolíticos / Selección de basidiomicetos proteolíticos / Selection of proteolytic basidiomycetes

Basidiomicetos têm sido amplamente utilizados como produtores de enzimas, no entanto são pouco explorados quanto a sua capacidade de produção de proteases. Estes fungos são reconhecidos pelas suas propriedades antitumorais, hipocolesterolêmicas, antimutagênicas, antioxidantes entre outras. Assim, a associação destas propriedades aos derivados do leite pode potencializar estes produtos como alimentos funcionais. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi selecionar basidiomicetos produtores de proteases, com potencial uso no processo de fabricação de derivados do leite. Foram utilizadas 27 linhagens de fungos crescidas em meio mínimo adicionado de 0,2% de caseína. A atividade proteolítica foi verificada pela formação de halo pela adição de uma solução saturada de (NH4)2SO4. Concluiu-se que a produção de proteases não apresenta relação com o crescimento micelial. O melhor produtor de proteases é a linhagem Lentinula edodes U8/1, seguida por Pleurotus sp (U2/9, U6/10 e U2/11). Os basidiomicetos Agaricus blazei (U4/3), Agaricus sp (U5/1), Flamulina sp (U5/4), Lycoperdon sp (U8/8), Agaricus blazei (U2/7), Agaricus blazei (U7/2), Agaricus blazei (U7/4) e Agaricus blazei (U7/5) não produzem proteases suficientes para serem medidas pela metodologia. Desta forma, estes resultados embasam o uso de Lentinula edodes e Pleurotus sp para o desenvolvimento de potenciais aplicações na hidrólise de proteínas em alimentos.

Basidiomycetes have been widely used as enzyme producers, but are poorly explored about their ability to produce protease. These fungi are known as antitumor, cholesterol-lowering, antimutagenic, antioxidant among other biological activities. Thus, the combination of basidiomycete properties to dairy products can improve them as functional foods. Therefore, the objective of this work was to screen basidiomycete protease producers to prospect the use of these fungi on dairy products. 27 basidiomycete strains grown on minimal medium supplemented with 0.2% casein were used. The proteolytic activity was verified by halo formation after a (NH4)2SO4 saturated solution addition on the culture medium. The production of proteases is not associated with mycelial growth. The best producers of proteases is Lentinula edodes U8/1 and after Pleurotus sp (U2/9, U6/10 e U2/11). The basidiomycetes of Agaricus blazei (U4/3), Agaricus sp (U5/1), Flamulina sp (U5/4), Lycoperdon sp (U8/8), Agaricus blazei (U2/7), Agaricus blazei (U7/2), Agaricus blazei (U7/4) and Agaricus blazei (U7/5) do not produce enough proteases to be measured by the methodology. Thus, these results support the use of Lentinula edodes and Pleurotus sp as potencial basidiomycetes for protein hydrolysis on food.

Basidiomicetos han sido ampliamente utilizados como productores de enzimas, pero poco exploradas en su capacidad de producción de proteasa. Estos hongos son reconocidos por sus propiedades antitumorales, reductor de colesterol, antimutagénicos, antioxidantes entre otras. Así, la asociación de estas propiedades a los derivados de la leche puede potencializar estos productos como alimentos funcionales. En este sentido, el objetivo de este trabajo fue seleccionar basidiomicetos productores de proteasas, con potencial uso en el proceso de fabricación de productos lácteos. Se utilizó 27 cepas de hongos crecidos en medio mínimo adicionado de 0,2% de caseína. La actividad proteolítica fue verificada por formación de halo por la adición de solución saturada de (NH4)2SO4. Se concluyó que la producción de proteasas no presenta relación con el crecimiento del micelio. El mejor productor de proteasas es la cepa de Lentinula edodes U8/1, seguida por Pleurotus sp (U2/9, U6/10 y U2/11). Los basidiomicetos Agaricus blazei (U4/3), Agaricus sp (U5/1), Flamulina sp (U5/4), Lycoperdon sp (U8/8), Agaricus blazei (U2/7), Agaricus blazei (U7/2), Agaricus blazei (U7/4) y Agaricus blazei (U7/5) no producen proteasas suficientes para que sean medidos por la metodología. Por lo tanto, estos resultados apoyan el uso de Lentinula edodes y Pleurotus sp para el desarrollo de potenciales aplicaciones en hidrólisis de proteínas en alimentos.

Produção de biomassa, proteases e exopolissacarídeos por Pleurotus ostreatus em cultivo líquido / Producción de biomasa, proteasas y exopolisacáridos por Pleurotus ostreatus en cultivo líquido / Biomass, exopolysaccharide and protease production by Pleurotus ostreatus in liquid cultivation

A renina é um complexo natural de enzimas (endopeptidases aspárticas) utilizada na produção de queijos, extraída principalmente de estômagos de bezerros jovens. A maior demanda por queijos e o alto custo da renina têm incentivado a procura de fontes alternativas de proteases. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi verificar as condições de tempo e temperatura para a produção de biomassa, exopolissacarídeos (EPS) e proteases por Pleurotus ostreatus em cultivo líquido. O micélio foi crescido em meio Pontecorvo, enriquecido com proteína isolada a 22, 25 ou 28oC, com amostragens aos 3, 6, 9, 14 e 17 dias de cultivo. A biomassa foi separada por centrifugação; EPS foram determinados por precipitação com etanol e a atividade proteolítica determinada pela ação do extrato enzimático sobre caseína solúvel alcalina 1% (m/v). Verificou-se que tanto o tempo quanto à temperatura afetaram (p<0,05) a produção de biomassa, EPS e proteases. Concluiu-se que a maior produção de biomassa de P. ostreatus ocorre após nove dias de cultivo a 25ºC; a produção de EPS aumenta com a ampliação do tempo de cultivo, com maior produção a 22ºC; e a máxima produção de proteases ocorre aos 14 dias de cultivo a 28ºC.

Rennet is a natural complex of enzymes (aspartic endopeptidases) and is often used in the production of cheese. Those enzymes (proteases) are extracted from abomasums of young ruminant animals. The high cheese demand associated with the high curdle cost have been stimulated the searching for alternative protease sources. The objective of this study was to verify the time and temperature conditions for biomass, exopolysaccharide (EPS) and protease production by Pleurotus ostreatus in liquid cultivation. The mycelium was grown in Pontecorvo medium added with isolated soy protein (5%) and maintained at 22, 25 or 28oC, with samplings at 3, 6, 9, 14 or 17 days of cultivation. The biomass was separated by centrifugation, EPS were separated by ethanol precipitation and the proteolytic activity was determined by enzymatic extract action on alkaline soluble casein 1% (m/v). It was verified that time and temperature affect (p<0.05) biomass, EPS and protease production. Most of P. ostreatus biomass production occurs after nine days of cultivation at 25°C. EPS production rise with increasing of cultivation time, with higher production at 22°C. Higher protease activity occurs at 28°C on 14 days of cultivation.

La renina es un complejo natural de enzimas (endopeptidasas aspárticas) utilizada en la producción de quesos, extraída principalmente de estómagos de becerros jóvenes. La mayor demanda por quesos y el alto costo de la renina ha incentivado la búsqueda de fuentes alternativas de proteasas. Así que, el objetivo de esta investigación fue verificar las condiciones de tiempo y temperatura para la producción de biomasa, exopolisacáridos (EPS) y proteasas por Pleurotus ostreatus en cultivo líquido. El micelio creció en medio a Ponte corvo, enriquecido con proteína aislada a 22, 25 o 28ºC, con muestras a los 3, 6, 9, 14 y 17 días de cultivo. Se separó la biomasa por centrifugación; EPS fueron determinados por precipitación con etanol y la actividad proteolítica determinada por la acción del estrato enzimático sobre caseína soluble alcalina 1% (m/v). Se verificó que tanto el tiempo como la temperatura afectaron (p<0,05) a la producción de biomasa, EPS y proteasas. Se concluye que la mayor producción de biomasa de P. ostreatus ocurre tras nueve días de cultivo a 25ºC; la producción de EPS aumenta con la ampliación del tiempo de cultivo, con mayor producción a 22ºC; y la máxima producción de proteasas ocurre a los 14 días de cultivo a 28ºC.